Eisenhaematoxylin nach Heidenhain

[Ronald Schulte]

Heute zeige ich mal eine Heidenhains Eisenhaematoxylin Färbung die ziemlich besonder ist.
Diese Färbung ist gut geeignet um Chromatin dar zu stellen.
Als übersichtsfarbung ist sie weniger geeignet.
Es ist eine regressive Färbung, was bedeutet das zuerst überfärbt wird und mit eine Differenzierung die gewünschte Farbintensität erreicht wird.
Romeis schreibt eine Beizlösung und eine Färblösung vor.
Meine Färbung geht aus von eine Aluinbeizlösung, Färblösung und ein Aluinlösung nach Armin Eisner. http://www.aeisner.de/

Haematoxylinlösung (klassische Methode) :
0.5g Haematoxylin in 10ml Ethanol 96%ig lösen und dann mit 90ml Aqua dest. verdünnen. Danach 4 Wochen unter Luftzutritt reifen lassen.
Haematoxylinlösung (künstl. Reifung) :
0.5g Haematoxylin in 10ml Ethanol 96%ig lösen und dann mit 90ml Aqua dest. verdünnen. Danach mit 0.1g Natriumjodat versetzen. Die Lösung ist sofort gebrauchsfertig.
Alaunbeize :
4g Eisenammoniumalaun in 96ml Aqua dest. lösen, mit 1ml Eisessig und 1.2ml 10%iger Schwefelsäure versetzen. Die Beize ist monatelang haltbar.
Alaunlösung :
2.5g Eisenammoniumalaun in 97.5ml Aqua dest. lösen. 1 - 2 Wochen haltbar.




Mein gebrauchtes Protokoll mit einen 2mikron dicken Ratten Testis Schnitt.

- Beizen in Alaunbeize  12 Stunden;
- Spulen AD;
- Haematoxylinlösung 1:1 mit Aqua dest. verdünnt. 12 Stunden;
- Spulen AD;
- Differenzieren in Alaunlösung unter Mikroskopkontrolle;
- Ausspülen in fließendem Wasser;
- Spulen AD;
- Entwässern, Xylol, Depex.


Dieses Bild gilt als Orientierung und ist mit Kernechtrubin gefärbt.
(an die rechterseite ist den Nebenhoden zu erkennen)

Stitch von 78 Bilder.



Tubuli Seminiferi.
Objektiv Leitz Plan Fluotar 16x



Tubuli Seminiferi, da schwarze Chromatin die Spermatozyten ist schon sichtbar.
Objektiv Leitz Plan Fluotar 25x



Objektiv Leitz Plan Apo 63x



Die Spermatiden sind fast fertig
Objektiv Leitz Plan Apo 63x



Objektiv Leitz Plan Apo 63x


Grüße Ronald

[Muschelbluemchen]

Hallo Roland

Super  Deine Eisenhämatoxylinfärbung und Deine Präparate. Ich selbst mag diese Färbung sehr, auch wenn sie
nur noch selten verwendet wird.
Die Kunst bei der Eisenhämatoxylinfärbung ist das rechtzeitige Abbrechen der Differenzierung, was Dir bei Deinen Präparaten
wunderbar gelungen ist.

mit freundlichen Grüßen
Leopold

[Ronald Schulte]

Leopold,

Das stimmt. Meistens differenziere ich auf Gefühl/Erfahrung aber hier geht das nicht. Unter den Stemi aber ist die Differenzierung gut zu beobachten. Das abspulen die Flüssigkeit auch gleich neben an das Mikroskop sonst ist es schon wider zu weit hin. Nach Romeis kann Mann auch das Alaun noch etwas verdünnen so das es nicht so schnell geht.

Grüße Ronald